Production of Anthocyanin by Culture of Hairy Roots of Raphanus sativus cv. Chungpihongsim

청피홍심무우(Raphanus sativus cv. Chungpihongsim)의 모상근 배양에 의한 안토시아닌 생성

  • 안준철 (전남대학교 자연과학대학 생물학과)
  • Published : 1992.03.01

Abstract

The hairy root culture of Raphanus sativus cv. Chungpihongsim was established by transformation with Agrobacterium rhizogenes $A_4$. The transformed roots grew well in adjusted Murashige and Skoog medium to 1/2 basal salts, pH 5.2, 3% sucrose. Agropine and mannopine, opine synthesized in the transformed tissue were detected in the extract of hairy roots. When 2, 4-D and kinetin were added in culture medium of hairy roots, the synthesis of anthocyanin was induced with disorganization of hairy root. Especially, addition of $0.45\;\mu\textrm{M}$ 2, 4-D and $2.3\;\mu\textrm{M}$ kinetin showed the maximum synthesis of anthocyanin. Pattern of anthocyanin synthesized in transformed roots was somewhat different from that of ordinary roots. However, aglycone part of all anthocyanin was identified as pelargonidin. The content of total anthocyanin in this sample was tentatively calculated 0.49 mg/g fresh weight.weight.

A. rhizogenes A4 균주를 접종하여 청피홍심무우(Raphanus sativus cv. Chungpihongsim)의 모상근 배양을 확립하였다. 형질전환된 뿌리는 MS 배지의 기본염을 1/2로 희석하고, pH는 5.2, sucrose는 3%로 조정한 배양조건에서 최적성장을 보였다. 형질전환된 조직에서 합성되는 물질인 opine, 즉 agropine과 mannopine이 모상근의 추출액에서 검출되었다. 배지에 2, 4-D와 Kinetin이 첨가될 경우 모상근의 탈분화와 더불어 세포내에 안토시아닌의 합성이 유도되었으며, 그 중 2, 4-D $0.45\;\mu\textrm{M}$과 kinetin $2.3\;\mu\textrm{M}$의 첨가에서 최대의 색소 축적능을 보였다. 모상근의 탈분화와 함께 유도되는 안토시아닌의 paper chromatography 전개양상은 경작뿌리에서 추출한 색소에 비하여 다소 차이를 보였지만 모든 안토시아닌의 aglycone은 pelargonidin으로 확인되었다. 이러한 시료의 총 안토시아닌 함량은 0.49 mg/g(f.w.)로 계산되었다.

Keywords